Свойства элективной солевой среды
Агар-манит-солевой (AMS) является средой для выращивания микроорганизмов в лабораторных условиях. Эта среда содержит агар (полисахаридный гель, получаемый из водорослей), манит (простой сахар) и различные соли, которые обеспечивают оптимальные условия для роста микроорганизмов.
Пептоны и высококонцентрированный бульон из мяса – это главные источники питательных элементов, которые нужны для того, чтобы росли микробы. Маннит – это шестиатомный спирт в виде бесцветных кристаллов, которые хорошо растворяется в воде, а феноловый красный – кислотно-основной индикатор, меняющий цвет от желтого до красного. Хлористый натрий осуществляет поддержку осмотического баланса.
ЭСА дает возможность заниматься выращиванием рода бактерий семейства Staphylococcaceae. При этом большое количество хлористого натрия, который присутствует в составе среды будет препятствовать размножению других микробов. У готовой питательной среды розоватый оттенок. Когда происходит утилизация маннита бактериями, появляется кислая продукция, которая меняет оттенок среды. Она становится желтой вместо розовой. Из-за того, что большая концентрация хлористого натрия можно будет среду инокулировать огромным количеством материала.
Если будет добавлено 5 процентов эмульсии желтка яйца, удастся найти липазную активность бактерий, относящихся к грамположительным неподвижным коккам и ферментации маннита. Большая концентрация в среде соли будет осветлять эмульсию желтка яйца. Появление липазы удастся найти с помощью возникновения матовой зоны желтого цвета вокруг колоний стафилококков.
Необходимые реактивы и материалы, не включенные в набор
Термостат
Водяная баня
Применение элективной солевой среды
Посев производится непосредственно на поверхность агара.
Для медицинской бактериологии:
- Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
- Засейте чашки.
- Инкубируйте при 37°С в перевернутом положении.
Для промышленной бактериологии:
- Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
- Засейте чашки предобогащенным образцом.
- Инкубируйте при 30-35°С в перевернутом положении.
Необходимо правильно выбрать условия культивирования в зависимости от целей использования и существующих стандартов. Учет и интерпретацию результатов проводят через 24 часа после начала инкубации. При получении отрицательного результата инкубацию следует продлить до 48 часов.
Регистрация результатов
По окончании инкубации проверьте наличие бактериального роста и внешний вид колоний: сбраживающие манит микроорганизмы (в частности, S.aureus), формируют желтые колонии, окруженные желтым пятном, распространяющимся в поверхность агара.Для идентификации микроорганизма пользуйтесь биохимическими и/или иммунологическими методами.
Контроль качества
Протокол: Для контроля питательных свойств среды рекомендуется использовать следующие штаммы: Staphylococcus aureus ATCC 25923.Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 18–24 часа и через 48 часов.| Микроорганизмы | Рост | Цвет колонии |
| Escherichia coli ATCC 25922 | Ингибируется | - |
| Escherichia coli ATCC 8739* | Ингибируется | - |
| Enterobacter aerogenes ATCC 13048 | Ингибируется | - |
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 | Хороший | Желтый |
| Staphylococcus aureus ATCC 6538* | Хороший | Желтый |
| Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 | Умеренный | Красный |
| Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 | Хороший | Красный |
| *Согласно рекомендациям Европейской Фармакопеи 7.0 инкубировать при 30–35°C в течение 18–72 часов. | ||
Примечание: Сотрудники лаборатории несут ответственность за проверку качества среды (частота, количество штаммов, температура культивирования и пр..) в соответствии с целями работы и установленными нормами и правилами.
Ограничение метода
- Сбраживание маннита не является специфической характеристикой S. aureus. Для окончательной идентификации необходимо пользоваться биохимическими и/или иммунологическими тестами.
- Некоторые другие микроорганизмы могут образовывать колонии на данной среде.
- Некоторые оксидазоположительные микроорганизмы (микрококки и стафилококки) могут давать отрицательные результаты для оксидазного теста на данной среде (Оксидазный тест).
- Рост зависит от индивидуальных характеристик штамма. Некоторые штаммы стафилококков, чувствительные к повышенным концентрациям NaCl, могут не образовать колоний на данной среде.
- В зависимости от целей исследования, рекомендуется использовать данную среду в сочетании с другой, неселективной, средой (например, Колумбийский агар + 5% бараньей крови).
Хранение
- Флаконы с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
- Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
