Готовая питательная среда Трехсахарный агар

Среда предназначена для дифференциации и идентификации энтеробактерий

Агар трехсахарный с железом (TSI) может использоваться для дифференциации кишечных грамотри-цательных энтеробактерий на основании ферментации углеводов и образования H2S. Он используется как вспомогательная среда для идентификации патогенных и сапрофитных энтеробактерий, выделенных при стандартном бактериологическом анализе проб, например фекалий. Среда используется для начала иденти-фикации энтеробактерий в некоторых схемах FDA (США).
Пептоновая смесь, мясной и дрожжевой экстракты являются источниками питательных веществ, необхо-димых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Агар TSI содержит три углевода (декстроза, сахароза и лактоза), которые являются источниками углерода и энергии. Обра¬зование кислоты в процессе их ферментации определяется с помощью индикатора фенолового красного, который меняется на желтый цвет при закислении среды и на красный – при защелачивании. Тиосульфат натрия восстанавливается до сульфида водорода, который реагирует с солью железа с образованием черного сульфида железа. Цитрат аммонийного железа – индикатор образования H2S. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
Глюкоза присутствует в среде в концентрации 1/10 по отношению к лактозе или сахарозе и способствует обнаружению микроорганизмов, ферментирующих только ее. В результате ферментации глюкозы на скошенной поверхности агара образуется небольшое количество кислоты, которая быстро окисляется. При этом цвет среды остается красным. С другой стороны, та же самая реакция внутри столбика агара, вследствие низкой концентрации кислорода, приводит к устойчивому снижению уровня рН и пожелтению среды. После истощения запасов глюкозы, начинается ферментация лактозы или сахарозы организмами, способными к их утилизации. Для улучшения воздухообмена на поверхности скоса не следует плотно закрывать пробирки.
Тип реакции такой же, как в случае Агара Клиглера с железом, который содержит два сахара. Добавление 1% сахарозы к агару TSI позволяет проводить дифференциацию между протеями и сальмонеллами. При ферментации сахарозы протеями цвет фенолового красного на поверхности меняется с красного на желтый. Виды рода Salmonella, положительные по декстрозе и отрицательные по лактозе, вызывают покраснение поверхности агара и пожелтение глубоких слоев среды.

Европейская Фармакопея для обнаружения сальмонелл рекомендует отдельно переносить исследуемые колонии на Агар трехсахарный с железом, инокулируя поверхностным и глубинным методами. О наличии сальмонелл в местах глубинной инокуляции свидетельствует смена цвета среды (с красного на желтый), обычно с образованием газа с формированием сульфида водорода в агаре или без такового. Более точное определение может быть получено путем проведения соответствующих биохимических и серологических тестов.
Инокулировать и инкубировать 18–72 часа при 35±2°C.


Хранение

Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8С до истечения срока годности

После вскрытия упаковки хранить не более 2 недель в целлофановом пакете при 2-8С

Состав среды

Расчетный состав, г/л дистиллированной воды

Пептоновая смесь 20,0

Лактоза (моногидрат) 10,0

Сахароза 10,0

Хлорид натрия 5,0

Мясной экстракт 3,0

Дрожжевой экстракт 3,0

Глюкоза (моногидрат) 1,0

Цитрат аммонийного железа 0,3

Тиосульфат натрия 0,3

Феноловый красный 0,025

Бактериологический агар 12,0

Состав набора

Готовая питательная среда Трехсахарный агар

Пробирки П0735