Свойства питательной среды Агар XLD
Агар XLD создается в соответствии с государственным стандартом ISO 6579. Используя агар XLD можно провести диагностическое тестирование для последующей утилизации 3 углеводов, действующих на повышение кислотной среды. При этом со временем красный оттенок среды будет изменен на желтый.
Добавление Тиосульфата натрия обособляет эффективность реакции за счет взаимодействия с железоаммонийным цитратом. Такой вариант больше всего будет действовать с индикатором сульфида, особенно в щелочной сфере. Лизин добавит дифференциации для подавления образования сальмонелл.
Как только происходит утилизация ксилозы и других инфекций путем ощелачивания среды, дополнительно будут идентифицированы необходимые для борьбы с вирусами колонии бактерий. Происходит это путем увеличения pH. Индикатор феноловый красного цвета определяет уровень pH.
Экстракт, состоящий из дрожжей, будет служить единственным источником витаминных элементов, особенно группы В. Дезоксилат натрия является селективным агентом, увеличивающим количество грамположительных бактерий. Инокуляция и инкубация занимает примерно сутки при температуре 37 °C.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Медицинская бактериология:
Посев из образца (кал, жидкий кал, разведение в физ. растворе) производится непосредственно на агар.
Промышленная микробиология:
Данная среда предназначена для контроля качества нестерильных фармацевтических продуктов. Среда описана во многих фармакопеях.
Также, среду можно использовать для определения Salmonella в пищевых продуктах после обогащения, в соответствии со стандартами ISO 6579, NF EN 12824, NF V08-052.
Соблюдайте правила транспортировки и хранения образцов.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
При необходимости подготовки чашек со средой:
- Ослабьте крышку флакона.
- Расплавьте агар на водяной бане, оснащенной системой безопасности (около 45 минут).
- Плотно закройте крышку и перемешайте.
- Оставьте флаконы при комнатной температуре минимум на 15 секунд, затем перенесите в термостатируемую водяную баню, установленную на 45-50°C. Оставьте на бане при этой температуре вплоть до использования.
- Перемешайте и разлейте по чашкам (18-20 мл на чашку).
Посев и инкубация:
Медицинская бактериология:
- При разливе среды из флаконов, выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
- Засейте чашки сразу после получения образцов.
- Инкубируйте чашки в перевернутом положении (вверх дном) при 37°C. Необходимо правильно выбрать условия культивирования, в соответствии с действующими рекомендациями и стандартами. Как правило, учет результатов производят через 24-48 часов культивирования.
Промышленная микробиология:
Пищевые продукты:
Посев на агар XLD производится после предварительного обогащения в пептонной воде с буфером и обогащения в бульоне Раппапорта-Вассилиадиса или селенит-цистиновом бульоне. Данную среду можно использовать для выделения в сочетании со средой SM ID, модифицированным агаром с бриллиантовой зеленью или агаром Hektoen.
- Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
- Засейте чашки обогащенным образцом.
- Инкубируйте вверх дном при 35-37°С в соответствующей атмосфере. Результат обычно учитывается через 24 – 48 часов инкубации.
Фармацевтические продукты:
Агар XLD рекомендован различными фармакопеями для выделения и определения Salmonella в нестерильных фармацевтических продуктах.
- Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
- Засейте чашки обогащенным образцом.
- Инкубируйте вверх дном при 35-37°С в соответствующей атмосфере. Результат обычно учитывается через 18 – 72 часа инкубации.
Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 37±1°C и наблюдались через 24±3 часа.| Микроорганизмы | Рост | Цвет колонии |
| Escherichia coli ATCC 25922 | Умеренный | Желтый (осадок) |
| Salmonella typhimurium ATCC 14028 | Хороший | Светло-красный (черный центр) |
| Shigella flexneri ATCC 12022 | Хороший | Красный |
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 | Ингибируется | - |
Ограничение метода
- Наличие кристаллов в агаре допустимо и не влияет на результат.
- Некоторые штаммы Salmonella arizonae и Shigella sonnei, сбраживающие лактозу, могут образовывать нехарактерные колонии.
- Энтеробактерии могут образовывать характерные колонии. Для окончательной идентификации следует пользоваться биохимическими и/или иммунологическими методами.
- Некоторые штаммы Salmonella и Shigella, имеющие специфические ростовые потребности (субстрат, температура, прочие условия культивирования), могут не образовать колоний на данной среде.
- В зависимости от типа образца, рекомендуется использовать агар XLD в сочетании с другой средой (SM ID, Hektoen, агар с бриллиантовой зеленью, модифицированный агар с бриллиантовом зеленью) или средой специального назначение (исследование кала: агар Campylosel, Yersinia, Clostridium difficile).
Результаты исследований
В работе использовали 112 бактериальных штаммов (Salmonella, Shigella, другие энтеробактерии и грам(+) бактерии). Культивирование осуществляли при 37°С.
Питательные качества среды:
Все исследованные штаммы Salmonella и Shigella образовали характерные колонии в течение 24 часов, кроме 4 штаммов S. sonnei. Пятьдесят два штамма прочих энтеробактерий также образовали колонии в течение 24 часов.
Селективные свойства:
Рост 14 из 15 штаммов грам(+) бактерий ингибировался (в течении 48 часов).
Хранение
- Флаконы с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
- Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности. После вскрытия упаковки хранить не более 2 недель в целлофановом пакете при 2-8°C.
