Колумбийский агар с 5% овечьей крови является высокопитательной средой общего назначения для изоляции и культивирования неприхотливых и требовательных микроорганизмов из различных клинических образцов и неклинических образцов, важных для общественного здравоохранения. Колумбийский кровяной агар был впервые описан в 1966 году Ellner et al., Который включил пептон животного происхождения, ферментативные расщепители казеина и обогащенную среду путем добавления дефибринированной овечьей крови в одну среду. Было обнаружено, что это улучшенный кровяной агар, способствующий пышному и быстрому росту, улучшенному производству пигментов, типичной морфологии колоний и четко выраженным гемолитическим реакциям.
Состав колумбийского агара с 5% овечьей крови
Панкреатический гидролизат казеина |
12,0 г |
Пептический гидролизат тканей животных |
5,0 г |
Экстракт дрожжей |
3,0 г |
Экстракт говядины |
3,0 г |
Кукурузный крахмал |
1.0 г |
Хлорид натрия |
5,0 г |
Агар |
13,5 г |
Овечья кровь, дефибринированная |
5% (50 мл) |
pH 7,3 ± 0,2 при 25 ° C
Принцип колумбийского агара с 5% овечьей крови
Среда содержит пептоны, которые поставляют азот, углерод, витамины и микроэлементы, необходимые для роста бактерий. Дрожжевой экстракт действует как поставщик комплекса витаминов B. Кукурузный крахмал служит источником энергии для организмов, а также нейтрализует токсичные метаболиты, поглощая токсичные побочные продукты, содержащиеся в образце. Хлорид натрия является источником необходимых электролитов и поддерживает осмотическое равновесие. Кровь овец добавляется для демонстрации гемолитических реакций и снабжения X-фактором (гемом), необходимым для роста многих патогенных видов. На этой среде колонии, как правило, больше и рост более интенсивный, чем на средах, содержащих другие основы кровяного агара.
Использование колумбийского агара с 5% овечьей крови
- Колумбийский кровяной агар рекомендуется в качестве часто используемой среды первичной изоляции для изоляции непривередливых и требовательных микроорганизмов из клинических образцов.
- Это первичная среда для изоляции, на которой будет расти большинство микроорганизмов, таких как Enterobacteriaceae, Pseudomonas и другие неферментирующие грамотрицательные палочки, стрептококки, энтерококки, стафилококки, коринеформы, виды Candida и многие другие.
Ограничения колумбийского агара с 5% овечьей крови
- Рекомендуется проводить биохимические, иммунологические, молекулярные и масс-спектрометрические исследования на колониях из чистой культуры для полной идентификации.
- В среде отсутствует V-фактор (никотинамидадениндинуклеотид, НАД), поскольку в крови овец содержится НАДаза, разрушающая НАД. Следовательно, Haemophilus influenzae, которому требуются факторы X и V, не будет расти на этой среде.
- Neisseria gonorrhoeae плохо растет на этой среде.
- Среда не подходит для изоляции и роста Mycobacterium, Legionella, Bordetella и других организмов с очень специфическими требованиями к питательным веществам.
- Из-за довольно высокого содержания углеводов (крахмала) в колумбийской агаровой основе, бета-гемолитические стрептококки могут проявлять альфа, а не бета-гемолитические реакции или могут проявлять слабые гемолитические реакции на средах на основе этого состава.