Применение среды Сабуро
Питательная среда Сабуро (Sabouraud Agar) имеет исключительно широкий спектр применения в микробиологии: используется для анализа клинического материала, при проведении санитарно микробиологического исследования помещений, а также для выявления микроорганизмов и грибов в косметических средствах и продуктах питания.
Входящие в состав питательной среды Сабуро пептон и казеин повышают ее питательные и ростовые качества. Эти компоненты богаты витаминами, аминокислотами и минеральными солями - важнейшими питательными веществами, необходимыми для роста бактерий и грибов.
Состав среды утвержден Европейской Фармакопеей. Декстроза – ферментируемый углевод, источник углерода и энергии. Пептоновая смесь является источником питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Высокая концентрация декстрозы в средах Сабуро и низкое значение pH делают эту среду селективной для грибов. Георг и др. (Georg et al.) показали, что данный агар с добавлением трех антибиотиков существенно улучшает выделение патогенных грибов из сильно контаминированных исследуемых материалов. Для приготовления селективной среды добавить в стерильных условиях следующие антибиотики: 0,4 г циклогексимида, 20 единиц пенициллина, 40 млг стрептомицин.
Инкубировать чашки в течение 3–7 дней при 30°C.
По рекомендации Европейской Фармакопеи, данную среду можно использовать для улучшения роста Candida albicans АТСС 10231 и Aspergillus brasiliensis АТСС 16404. Рост белых колоний может свидетельствовать о присутствии Candida albicans, для подтверждения провести идентификационные тесты.
Анализируемые образцы
Среда предназначена для работы с дрожжевыми и плесневыми грибами. Посев производится непосредственно на поверхность агара.
Соблюдайте правила транспортировки и хранения образцов.
Среду можно также использовать для пересева и выделения чистых культур.
Проведение анализа при помощи среды Сабуро
Среда предназначена для работы с дрожжевыми и плесневыми грибами. Посев производится непосредственно на поверхность Сабуро Агар. Среду можно также использовать для пересева и выделения чистых культур.
При необходимости подготовки чашек со средой:
- Ослабьте крышку флакона.
- Расплавьте агар на водяной бане, оснащенной системой безопасности (около 45 минут).
- Плотно закройте крышку и перемешайте.
- Оставьте флаконы при комнатной температуре минимум на 15 секунд, затем перенесите в термостатируемую водяную баню, установленную на 45-50°C. Оставьте на бане при этой температуре вплоть до использования.
-
Перемешайте и разлейте по чашкам (18-20 мл на чашку).
Посев и инкубация:
- Выдержите до достижения комнатной температуры.
- Засейте сразу после получения образцов.
- Инкубируйте в соответствующей атмосфере
- Инкубируйте при 30°C. Время инкубации зависит от типа образца и целей исследования. Как правило, учет результата производится через 48-72 часов. При необходимости инкубацию следует продлить.
Регистрация результатов
- По окончании инкубации оцените рост.
- Для идентификации микроорганизма пользуйтесь биохимическими и/или иммунологическими методами.
Контроль качества
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 30°C и наблюдались через 3–7 суток.| Микроорганизмы | Рост |
| Aspergillus brasiliensis ATCC 16404* | Хороший |
| Candida albicans ATCC 10231** | Хороший |
| Escherichia coli ATCC 25922 | Умеренно-хороший |
| Escherichia coli ATCC 8739 |
Умеренно-хороший |
| Lactobacillus casei ATCC 9595 |
Хороший |
| Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 |
Хороший |
|
* Для получения не более 100 КОЕ/мл инкубировать до 5 дней при 20–25°C. ** Инкубировать при 30–35°C в течение 24–48 часов. Для получения не более 100 КОЕ/мл инкубировать до 5 дней при 20–25°C. |
|
Примечание: Сотрудники лаборатории несут ответственность за проверку качества среды (частота, количество штаммов, температура культивирования и пр..) в соответствии с целями работы и установленными нормами и правилами.
Ограничения метода
Некоторые штаммы, имеющие специфические ростовые потребности, могут не образовать колоний на данной среде. Поскольку некоторые патогенные грибы могут образовывать легко увлекаемые воздушными потоками споры, для профилактики лабораторных заражений исследования рекомендуется проводить в ламинарном боксе.Хранение
- Флаконы с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
- Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности. После вскрытия упаковки хранить не более 2 недель в целлофановом пакете при 2-8°C.
