Среда Ловенштейна-Йенсена (среда LJ) — это селективная среда, которая обычно используется для культивирования и выделения микобактерий, в частности Mycobacterium tuberculosis, из клинических образцов. Среда LJ была первоначально разработана Ловенштейном. кто включил конго красный и малахитовый зеленый, чтобы подавить нежелательные бактерии. Настоящая композиция включает глицерированную среду на основе яиц и основана на модификации Дженсена. Дженсен модифицировал среду Левенштейна, изменив содержание цитрата и фосфата, исключив краситель конго красный и увеличив концентрацию малахитового зеленого. Gruft дополнительно модифицировал среду LJ, добавив пенициллин, налидиксовую кислоту и рибонуклеиновую кислоту (РНК) для повышения селективности. Эта среда поддерживает рост множества микобактерий, а также может использоваться для тестирования ниацина.
Состав Lowenstein Jensen (LJ)
Ингредиенты |
Количество |
Картофельная мука |
30,0 г |
L-аспарагин |
3,6 г |
Монофосфат калия |
2,4 г |
Цитрат магния |
0,6 г |
Малахитовый зеленый |
0,4 г |
Сульфат магния |
0,24 г |
Глицерин |
12 мл |
Яичная основа |
1000 мл |
Принцип Lowenstein Jensen (LJ) Media
L-аспарагин и картофельная мука - источники азота и витаминов. Монофосфат калия и сульфат магния усиливают рост организма и действуют как буферы. Малахитовый зеленый предотвращает рост большинства загрязнителей, оставшихся после дезактивации образца, одновременно способствуя росту микобактерий. Яичная суспензия содержит жирные кислоты и белок, необходимые для метаболизма микобактерий. При нагревании яичный альбумин коагулирует, обеспечивая твердую поверхность для инокуляции. Глицерин служит источником углерода и благоприятен для роста туберкулезной палочки человека, но неблагоприятен для бычьего типа.
Входящие в состав готовой питательной среды Левенштейна-Йенсена яичная эмульсия, L-аспарагин и картофельный крахмал, богатые питательными элементами, позволяют создать условия, идеальные для выращивания микобактерий туберкулеза. Глицерин и куриное яйцо - богатые источники жирных кислот и белка, способствующих метаболизму микроорганизмов. Малахитовый зеленый выполняет функцию индикатора кислотности, а также является ингибитором роста. Появление на поверхности питательной среды зон, окрашенных в синий цвет, свидетельствует о повышении кислотности, вследствие роста грамположительных бактерий. Рост грамотрицательных бактерий сопровождается появлением желтых зон.
В методе Графта пенициллин и налидиксовая кислота вместе с малахитовым зеленым предотвращают рост большинства загрязнителей, выживших после дезинфекции образца, одновременно способствуя скорейшему росту микобактерий. РНК действует как стимулятор и помогает увеличить скорость выделения микобактерий.
Использование Lowenstein Jensen (LJ)
- Он используется для диагностики микобактериальных инфекций.
- Он используется для тестирования чувствительности изолятов к антибиотикам.
- Он также используется для дифференциации различных видов микобактерий (по морфологии колонии, скорости роста, биохимическим характеристикам и микроскопии).
Ограничения Lowenstein Jensen (LJ) Media
- Рекомендуется проводить биохимические и / или серологические тесты на колониях из чистой культуры для полной идентификации.
- Среда LJ требует инкубации в атмосфере с 5-10% CO2 для выделения микобактерий. Микобактерии по неизвестным причинам плохо извлекаются из сосудов для тушения свечей.
- Отрицательные результаты посева не исключают активного заражения микобактериями.
- Из-за различий в питании можно встретить некоторые штаммы, которые плохо растут или не могут расти на этой среде. Для подтверждения наличия Mycobacterium spp. Необходимы дальнейшие тесты.
- Носители следует защищать от всех источников света, так как малахитовый зеленый очень светочувствителен.