Входящий в состав готовой питательной среды цетримид, выступает в качестве селективного агента, ингибирующего рост сопутствующих микроорганизмов, кроме Pseudomonas aeruginosa. Цетримид способствует высвобождению азота и фосфора из клеток бактерий, за исключением синегнойной палочки.
Сульфат калия и хлорид натрия обеспечивают среду положительно заряженными ионами - катионами, которые способствуют активному синтезу пиоцианина и повышению пигментации.
Бактерии, формирующие колонии зеленых и синих оттенков, которые флуоресцируют под светом ультрафиолетовых ламп, с высокой долей вероятности являются Pseudomonas aeruginosa. Для подтверждения результата, необходимо проведение биохимических тестов.
Меры предосторожности
-
Только для диагностики in vitro.
- К работе допускается только квалифицированный персонал.
-
Данный набор содержит вещества животного происхождения. Сертификат происхождения и/или санитарного состояния животных, от которых были получены данные материалы, не гарантирует отсутствия трансмиссивных патогенных микроорганизмов. Рекомендуется обращаться с этими веществами как потенциально опасными и в соответствии с принятыми нормами (не вдыхать, не глотать).
-
При работе с образцами и микробными культурами необходимо соблюдать стерильность в соответствии с законодательством и нормативными актами Российской Федерации, соблюдение "Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.).
-
Не используйте среды в качестве компонентов и сырья для производства.
-
Не используйте реактивы по истечении срока годности.
-
Не используйте флаконы со следами контаминации.
-
Перед использованием убедитесь в целостности упаковки и емкости.
-
При работе следуйте инструкции. Любые изменения описанной процедуры могут привести к искажению результатов.
- При интерпретации результатов необходимо принимать во внимание анамнестические данные больного, источник выделения микроорганизма, морфологию колоний, данные клеточной микроскопии, а также результаты других проведенных исследований.
Необходимые реактивы и материалы не включенные в набор:
- Термостат
- Водяная баня
Анализируемые образцы
Медицинская бактериология:
Посев из образца (гной, мокрота) производится непосредственно на агар. Соблюдайте правила транспортировки и хранения образцов.
Проведение Анализа
При необходимости подготовки чашек со средой:- Ослабьте крышку флакона.
- Расплавьте агар на водяной бане, оснащенной системой безопасности (около 45 минут).
- Плотно закройте крышку и перемешайте.
- Оставьте флаконы при комнатной температуре минимум на 15 секунд, затем перенесите в термостатируемую водяную баню, установленную на 45-50°C. Оставьте на бане при этой температуре вплоть до использования.
- Перемешайте и разлейте по чашкам (18-20 мл на чашку).
Медицинская бактериология:
- При разливе среды из флаконов, выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
- Засейте чашки сразу после получения образцов.
- Инкубируйте чашки в перевернутом положении (вверх дном) при 37°C. Необходимо правильно выбрать условия культивирования, в соответствии с действующими рекомендациями и стандартами. Как правило, учет результатов производят через 24-48 часов культивирования.
Регистрация результатов
- По окончании инкубации оцените бактериальный рост колоний
- Для идентификации микроорганизма пользуйтесь биохимическими и/или иммунологическими методами
Контроль качества
Протокол:
Для контроля качества рекомендуется использовать следующий штамм: Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды c добавлением глицерина на тестовых культурах после инкубации при температуре 36±2°C и наблюдались через 24−48 часов.| Микроорганизмы | Рост |
| Escherichia coli ATCC 25922 | Ингибируется |
| Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 | Хороший |
| Staphylococcus aureus ATCC 25923 | Ингибируется |
Примечание: Сотрудники лаборатории несут ответственность за проверку качества среды (частота, количество штаммов, температура культивирования и пр..) в соответствии с целями работы и установленными нормами и правилами.
Ограничения метода
Данную среду не рекомендуется использовать для определения дерматофитов.- Некоторые штаммы, имеющие специфические ростовые потребности (температура, прочие условия культивирования) могут не образовать колоний на данной среде.
- Рекомендуется использовать данную среду в сочетании с другой средой (агар Сабуро без антибиотиков или с актидионом,
Результаты исследований
В исследовании использовали 30 бактериальных штаммов. У всех штаммов наблюдался хороший рост. Культивирование осуществляли при 33-37°C. Питательные качества среды: Все штаммы образовали колонии за 48 часов.
Хранение
- Флаконы с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
- Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности.
- После вскрытия упаковки хранить не более 2 недель в целлофановом пакете при 2-8°C.
