Готовая питательная среда Агар Симмонса

Агар Симмонса с цитратом используется для дифференциации грамотрицательных кишечных бактерий на основании утилизации цитрата натрия в качестве источника углерода и утилизации неорганической соли аммония в качестве источника азота. Рекомендуется для дифференциации колиформ, выделенных из воды и клинических образцов.

Цитратный агар Симмонса - это селективная и дифференциальная среда, которая проверяет способность организма использовать цитрат в качестве единственного источника углерода и ионы аммония в качестве единственного источника азота. Он используется для дифференциации грамотрицательных бактерий на основе утилизации цитрата. Это полезно для отбора организмов, которые используют цитрат в качестве основного источника углерода и энергии. Первоначально цитратная среда была разработана Козером и содержала соль аммония в качестве единственного источника азота и цитрат в качестве единственного источника углерода для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes с помощью тестов IMViC. Позже Симмонс модифицировал рецептуру Козера, добавив агар и бромтимоловый синий.

Состав цитратного агара Симмонса

Конечный pH (при 25 ° C) 6,8 ± 0,2

Принцип цитратного агара Симмонса

Цитратный агар Симмонса используется для проверки способности организма использовать цитрат в качестве источника энергии. Дигидрофосфат аммония и цитрат натрия служат единственными источниками азота и углерода соответственно. Фосфат калия действует как буфер . Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Сульфат магния является кофактором множества метаболических реакций. Бромтимоловый синий является индикатором pH. Бактериологический агар - загуститель.

Организмы, способные утилизировать дигидрофосфат и цитрат аммония, будут неограниченно расти на этой среде. Если можно использовать цитрат, микроб будет накапливать щелочные / щелочные побочные продукты. Бактерии, которые могут расти на этой среде, вырабатывают фермент цитрат-пермеазу , способный превращать цитрат в пируват . Затем пируват может войти в метаболический цикл организма для производства энергии . Рост указывает на использование цитрата, промежуточного метаболита в цикле Кребса. Использование цитрата зависит от присутствия фермента цитразы, вырабатываемого организмом, который расщепляет цитрат до щавелевоуксусной кислоты и уксусной кислоты. Эти продукты позже превращаются в пировиноградную кислоту и диоксид углерода. Образовавшийся диоксид углерода соединяется с натрием и водой с образованием карбоната натрия, щелочного продукта. На щелочность среды указывает изменение цвета индикатора pH. Сдвиг pH превращает индикатор бромтимолового синего в среде с зеленого на синий при pH выше 7,6, и это является положительным тестом.

Интерпретация результатов на цитратном агаре Симмонса

Использование цитратного агара Симмонса

1. Он используется для дифференциации между Enterobacteriaceae и членами группы aerogenes на основе использования цитрата в качестве единственного источника углерода.

2. Цитратный агар Симмонса можно использовать для дифференциации цитрат-положительных Salmonella enteritidis и представителей подрода Salmonella II, III и IV от цитрат-отрицательных Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella pullorum и Salmonella gallinarum .

Ограничения цитратного агара Симмонса

1. Перед использованием воды убедитесь, что pH воды составляет от 6,5 до 7,0. Первоначальный цвет среды может отличаться от ожидаемого, если вышеуказанные меры предосторожности не соблюдены.

2. Уровень pH влияет на производительность среды, и его необходимо правильно контролировать.

3. Среда должна быть свежеприготовленной, потому что в сухих условиях изменение цвета может появиться еще до посева, особенно в нижней части скошенной почвы.

4. Некоторые организмы способны расти на цитрате и не изменяют цвет. Рост считается положительным тестом на утилизацию цитрата даже при отсутствии изменения цвета.

5. Посевной материал должен быть из чистой ночной культуры, выращенной на твердой среде, а не из бульонной суспензии.

6. Рекомендуется проводить биохимические, иммунологические, молекулярные или масс-спектрометрические исследования на колониях из чистой культуры для полной идентификации.

7. Невыполнение инкубации пробирок с незакрепленными крышками может привести к ложноотрицательным результатам.

8. Используйте легкий посевной материал, чтобы заштриховать наклон; обильный посевной материал может привести к ложноположительным результатам.

9. При посеве нескольких биохимических веществ из одной и той же культуры сначала засевайте эту среду или иглу для инокуляции пламенем перед нанесением штрихов на эту среду. Перенос глюкозы или других питательных веществ в эту среду может привести к ложноположительным результатам.