Агар MRS (de Man, Rogosa и Sharpe agar) — питательная среда, специально разработанная для выращивания лактобацилл и других лакто- и молококислых бактерий. Она часто используется в микробиологических исследованиях, а также в пищевой и фармацевтической промышленности для культивирования и идентификации пробиотиков.
Состав среды MRS
-
Экстракт мяса: источник азота, витаминов, минералов и аминокислот.
Пептон: источник углерода и азота для роста бактерий.
Глюкоза: основной источник энергии для бактерий.
Цитраты: стабилизируют рН среды.
Фосфаты: обеспечивают буферные свойства.
Ацетат: может служить источником углерода.
Магний и марганец: необходимы для роста некоторых бактерий.
Агар: используется как загуститель.
Хранение питательной среды MRS
Температура хранения: Готовые пластины с MRS-агаром обычно хранятся в холодильнике при температуре от +4°C до +8°C. Это предотвращает высыхание среды и рост случайных микроорганизмов.
Упаковка: Пластины следует хранить в пластиковых или плотных бумажных упаковках, чтобы предотвратить загрязнение и потерю влаги. Если пластины упакованы индивидуально, их можно укладывать друг на друга.
Ориентация: Пластины следует хранить в положении "агар вверх", чтобы предотвратить конденсацию влаги на поверхности агара.
Срок годности: Хотя некоторые питательные среды могут сохранять свои свойства дольше, рекомендуется использовать пластины с MRS-агаром в течение 2-4 недель после приготовления. С течением времени агар может высыхать или происходить другие изменения, которые снижают качество среды.
Проверка перед использованием: Перед использованием следует проверить пластины на наличие видимых признаков загрязнения, изменения цвета или других аномалий.
Записи: На каждой пластине или упаковке рекомендуется делать метку с датой приготовления и сроком годности, чтобы обеспечить использование среды в рамках рекомендуемого срока годности.
Переход от холодильника к температуре комнаты: Перед использованием пластины следует акклиматизировать их при комнатной температуре в течение нескольких часов. Это предотвратит конденсацию на поверхности агара.
Проведение анализа
Подготовка образцов:Пробы, такие как продукты питания, должны быть предварительно обработаны (например, гомогенизированы) и разведены в стерильном буфере или солевом растворе.
Посев:
Используя петлю или стерильные шпатели, внести малое количество пробы или разведенного образца на поверхность агара MRS. Провести посев методом "в прямую линию" или "с зигзагом".
Инкубация:
Пластины помещают в инкубатор при температуре 30-37°C (зависит от интересующего вас штамма) на 24-72 часа. Некоторые лактобациллы могут требовать анаэробные условия, так что иногда используется анаэробный контейнер или инкубатор.
Оценка роста:
После инкубации проверьте пластины на наличие колоний. Колонии лактобацилл на MRS обычно округлые, гладкие, прозрачные или слегка мутные.
Если целью является количественный анализ, подсчитайте количество колоний на пластине и, учитывая разведение, рассчитайте количество микроорганизмов в оригинальной пробе.
Идентификация:
Если необходимо определить вид лактобацилл, можно взять колонии для дополнительного анализа, такого как микроскопия, биохимические тесты или молекулярно-биологические методы.
Регистрация результатов:
Запишите количество и характеристики колоний, а также все другие наблюдения, связанные с ростом на агаре MRS.
При проведении анализа важно соблюдать стерильные условия и использовать контрольные штаммы для подтверждения работоспособности питательной среды и правильности интерпретации результатов.
