Среда Плоскирева (Salmonella Shigella)

Среда СШ (Плоскирева) предназначена для селективного выделения и дифференциации Salmonella и Shigella из клинических образцов (кал), также используется для исследования пищевых и фармацевтических продуктов на наличие сальмонелл.

Применение среды Плоскирева

Агар Сальмонелла Шигелла (среда Плоскирева) – селективная и дифференциальная среда, широко применяемая в санитарной бактериологии для выделения Salmonella spp. и Shigella spp. из фекалий, мочи, а также свежих и консервированных пищевых продуктов.

Благодаря сильной ингибирующей способности Агар Сальмонелла Шигелла можно засевать штрихом большим количеством посевного материала, однако параллельно следует засевать штрихом другие, менее ингибирующие среды, такие как Агар с дезоксихолатом, Агар МакКонки, Агар XLD и Агар гектоеновый для энтеробактерий.

Инокулировать и инкубировать 18–24 ч при 35±2°C.

Мясной экстракт и пептоновая смесь являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Лактоза – ферментируемый углевод, источник углерода и энергии. Смесь солей жирных кислот, цитрат натрия и бриллиантовый зеленый ингибирует грамположительные бактерии, большинство колиформных бактерий и бурный рост Proteus spp., при этом допуская рост Salmonella spp. Нейтральный красный – индикатор рН. Тиосульфат натрия и цитрат железа способствуют обнаружению бактерий, выделяющих H2S, таких как протеи и некоторые штаммы сальмонелл, которые образуют колонии с черным центром и светлым ореолом. Бактерии, не ферментирующие лактозу (предполагаемые патогены), образуют светлые колонии, прозрачные или бесцветные, тогда как колиформы в достаточной мере ингибируются и образуют маленькие колонии цветом от розового до красного.

Высокоселективный состав данной среды не рекомендован для первичного выделения Shigella spp. из-за возможного ингибирования некоторых видов.

• Среда соответствует рекомендациям европейской фармакопеи (среда К), стандартов USP

• Согласно стандартам ISO 6579, NF EN 12824, NF V 08- 052, данная среда может использоваться для определения Salmonella в пищевых продуктах.

Микроорганизмы, продуцирующие декарбоксилазу, образуют красные колонии (декарбоксилирование лизина).

Проведение анализа с помощью среды Плоскирева

Медицинская микробиология

Посев и инкубация:

1. Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
2. Засейте чашки сразу после получения образцов.
3. Инкубируйте в соответствующей атмосфере, при необходимости используйте газогенераторы (анаэростат).
4. Инкубируйте в перевернутом положении (вверх дном) при 37°C. Время инкубации зависит от типа образца и целей исследования. Как правило, учет результата производится через 24-48 часов. При необходимости инкубацию следует продлить.

Промышленная микробиология

Пищевые продукты:

Посев производится после предварительного обогащения в пептонной воде с буфером и обогащения в бульоне Раппапорта-Вассилиадиса или селенит-цистиновом бульоне.

1. Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
2. Засейте чашки обогащенным образцом.
3. Инкубируйте вверх дном при 35-37°С в соответствующей атмосфере. Результат обычно учитывается через 24 – 48 часов инкубации.

Фармацевтические продукты:

Рекомендован различными европейскими фармакопеями для выделения и определения Salmonella в нестерильных фармацевтических продуктах.

1. Выдержите чашки до достижения комнатной температуры.
2. Засейте чашки обогащенным образцом.
3. Инкубируйте вверх дном при 35-37°С в соответствующей атмосфере. Результат обычно учитывается через 18 – 72 часа инкубации.

Регистрация результатов

Характеристики колоний

• Shigella spp. и большая часть сальмонелл: светлые, бесцветные, прозрачные.  Escherichia coli: маленькие, розово-красные.
• Enterobacter spp., Klebsiella spp.: крупнее, чем у E. coli, слизистые, бледные, матовые, от кремового до розового цвета.
• Proteus spp. и некоторые сальмонеллы: бесцветные, прозрачные, с черным центром в случае образования H2S.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации в анаэробных условиях при температуре 35±2°C и наблюдались через 18–24 часа.

Микроорганизмы	Рост	Цвет колонии
Enterobacter aerogenes ATCC 13048	Часто ингибируется	Кремово-розовый
Salmonella enteritidis ATCC 13076	Хороший	Бесцветный с черным центром
Salmonella typhi ATCC 6539	Хороший	Бесцветный с черным центром
Salmonella typhimurium ATCC 14028	Хороший	Бесцветный с черным центром
Shigella flexneri ATCC 12022	Хороший	Бесцветный
Enterococcus faecalis ATCC 19433	Ингибируется	-
Escherichia coli ATCC 25922	Ингибируется	-

Ограничения метода

• Некоторые штаммы, имеющие специфические ростовые потребности, могут не образовать колоний на данной среде.
• Данная среда может быть использована в сочетании с другой селективной средой, в зависимости от типа образца и целей исследования

Хранение

Чашки с агаром следует хранить в оригинальной упаковке при 2-8°C до истечения срока годности. После вскрытия упаковки хранить не более 2 недель в целлофановом пакете при 2-8°C.

Утилизация отходов

Утилизируйте отходы в соответствии с требованиями, предъявляемыми для утилизации инфекционных материалов. Ответственность за утилизацию несут сотрудники лаборатории.