Грибы рода Candida занимают важное место в микробиологии, поскольку они могут быть как безвредными обитателями микробиома человека, так и опасными патогенами, вызывающими инфекции. В лабораторных условиях культивирование Candida spp. необходимо для диагностики заболеваний, исследований и разработки новых методов лечения.
Особенности грибов Candida
Грибы рода Candida - дрожжеподобные грибы, одноклеточные микроорганизмы овальной или круглой формы, одноклеточные аэробы. Образуют псевдомицелий (нити из удлиненных клеток), бластоспоры (клетки почки, сидящие на перетяжках псевдомицелия) и некоторые хламидоспоры — споры с двойной оболочкой.
Различные виды грибов рода Candida имеют особенности метаболизма, широко используемые в диагностике кандидоза. Для грибов рода Candida характерны следующие биохимические свойства: рост культуры при температуре 30-37°С и оптимальной среде существования ph=5,8-6,5, но грибы также способны в течение длительного времени переносить и резкокислые среды; способность ферментировать и ассимилировать углеводы. Тип дыхания грибов рода Candida аэробный. Данные микроорганизмы проявляют тропизм к тканям богатым гликогеном, то есть обладают гликофилией.
Известно более 200 видов грибов этого рода, часть из которых являются частью нормального микробиома человека, однако чрезмерный рост этих грибов может приводить к серьезным заболеваниям. Приоритетными патогенами являются следующие виды : Candida albicans, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida crusei (Picha kudriavzevii).
Кандидоз — инфекционно-воспалительное заболевание кожи и слизистых оболочек полости рта, урогенитального тракта, ногтей, имеет локальный характер; при особых условиях принимает генерализованный характер.
Микробиологическая диагностика кандидозной инфекции проводится с применением селективных и дифференциальных питательных сред , а также, при необходимости дополнительно используются биохимические и температурные тесты для подтверждения вида. Грибы рода Candida идентифицируют по морфологическим, культуральным и биохимическим характеристикам с применением специализированных тестовых систем, теста на ростковые трубки.
При кандидозе в мазках из клинического материала выявляют псевдомицелий , мицелий с перегородками и почкующиеся бластоспоры. Проводят посевы на питательные среды. Грибы дифференцируют по морфологическим, биохимическим и физиологическим свойствам. Виды кандид отличаются при росте на глюкозо-картофельном агаре по типу филаментации — расположению гломерул — скоплений мелких округлых дрожжеподобных клеток вокруг псевдомицелия. При культивировании на жидких средах с сывороткой или плазмой для C. albicans характерно образование «ростковых трубок». На рисовом агаре у C. albicans выявляют хламидоспоры.
Питательные среды для культивирования Candida spp
Культивирование грибов осуществляют в термостатах при температуре 22-28 градусов до 2 недель. Некоторые возбудители глубоких микозов выращиваются при температуре 37 градусов. Окончательную оценку количеству выросших колоний грибов рода Candida осуществляют через 5-7 дней. Выбор питательной среды для грибов Candida в лабораторных условиях зависит от цели исследования.
Сабуро агар является одной из наиболее популярных сред для культивирования грибов, включая Candida. Эта среда обогащена глюкозой и пептоном, что обеспечивает быстрый рост грибов.
Хромогенные среды позволяют различать виды Candida по цвету колоний, что упрощает диагностику. Например, Candida albicans образует зеленые колонии, тогда как Candida tropicalis — синие,
Преимущества:
- Быстрая и точная идентификация видов.
- Упрощение процесса диагностики в клинических образцах.
- Кукурузный агар с Tween 80
Эта среда используется для индукции хламидоспор у Candida albicans, что помогает в идентификации этого вида.
- Среды с антибиотиками (Среда Сабуро с добавками)
Для предотвращения контаминации бактериальной микрофлорой могут использоваться среды, содержащие антибиотики, такие как хлорамфеникол.
Преимущества:
- Снижение риска контаминации.
- Более чистая изоляция грибов.
5. Картофельный агар
Виды кандид отличаются при росте на данной среде по типу филаментации — расположению гломерул — скоплений мелких округлых дрожжеподобных клеток вокруг псевдомицелия.
Идентификацию выделенных культур проводят по внешнему виду и форме колоний, по их консистенции, цвету и микроскопическому строению. Для идентификации полученной культуры возбудителя используют проростковую пробу (тест образования зародышевых трубок) и биохимические исследования. Среди биохимических исследований приоритет принадлежит определению способности выделенной культуры грибов к ассимиляции и ферментации углеводов, несколько реже используются тесты ассимиляции азота, а также определение уреазной активности и активности отдельных специфических ферментов.
Методы культивирования Candida в лабораторных условиях играют ключевую роль в диагностике и исследовании кандидозных инфекций. Использование различных питательных сред и методов обеспечивает успешное выделение и идентификацию этих грибов. Понимание особенностей роста Candida и применение современных технологий позволяют достигать высокой точности и надежности в диагностике и лечении инфекций, вызванных этими микроорганизмами.